บทความนี้จะกล่าวถึงปรากฏการณ์ของปฏิกิริยาการตกตะกอน เราจะพิจารณาคุณสมบัติของการกำหนดปรากฏการณ์นี้ ปรากฏการณ์การแพร่กระจาย ลักษณะทั่วไป บทบาทในชีวิตมนุษย์ และอื่นๆ อีกมากมาย
รู้เบื้องต้นเกี่ยวกับปรากฏการณ์
การตกตะกอนเป็นปรากฏการณ์ของประเภทซีรัมวิทยา ในระหว่างที่แอนติเจนที่ละลายน้ำได้มีปฏิสัมพันธ์กับแอนติบอดี และส่งผลให้มีการตกตะกอน - เกิดการตกตะกอน
ลักษณะทั่วไปของปฏิกิริยาการตกตะกอนเป็นรูปแบบของ อิทธิพลที่ประสานกันของแอนติเจนและแอนติบอดี ปฏิกิริยาประเภทนี้ทำให้สามารถระบุการมีอยู่ของแอนติเจนที่ไม่รู้จักในสารทดสอบโดยการเพิ่มแอนติบอดีและแอนติเจนที่รู้จัก กระบวนการตกตะกอนโดยปราศจากเกลือจะยิ่งแย่ลงไปอีก และค่าที่เหมาะสมที่สุดอยู่ในช่วง pH 7.0-7.4
องค์ประกอบของปฏิกิริยา
องค์ประกอบของปฏิกิริยาหยาดน้ำฟ้ามีสามองค์ประกอบหลัก:
- แอนติเจนที่มีลักษณะโมเลกุล. อยู่ในสถานะดี กล่าวอีกนัยหนึ่ง มันละลายได้ นอกจากนี้ แอนติเจนดังกล่าวเรียกว่า precipitogen ซึ่งเป็นไลเสตหรือสารสกัดจากเนื้อเยื่อ เป็นต้น สารตกตะกอนมีลักษณะแตกต่างไปจาก agglutinogen ซึ่งมีขนาดเท่ากับอนุภาคที่ประกอบด้วย แอกกลูติโนเจนมีขนาดของเซลล์โดยธรรมชาติ และสารตกตะกอนนั้นสัมพันธ์กับขนาดของโมเลกุล สารละลายแอนติเจนมีลักษณะโปร่งใส
- แอนติบอดีที่พบในซีรั่มในเลือดมนุษย์และในซีรัมวินิจฉัยภูมิคุ้มกันซึ่งมีแอนติบอดีที่ทำการศึกษา
- อิเล็กโทรไลต์คือสารละลายโซเดียมคลอไรด์ที่มีไอโซโทนิก
การผลิตตะกอน
การตั้งค่าปฏิกิริยาการตกตะกอนเป็นไปไม่ได้หากไม่มีการตกตะกอน ซึ่งได้มาจากการบดวัสดุและการแยกโปรตีนแอนติเจนออกจากพวกมัน การสกัดเกิดขึ้นจากการต้มหรือวิธีอื่นๆ
Lysates เช่นเดียวกับสารสกัดจากเนื้อเยื่อและอวัยวะ ซีรั่มในเลือด ตัวกรองประเภทต่างๆ ตามวัฒนธรรมน้ำซุปของจุลินทรีย์ ตลอดจนสารสกัดจากเกลือของจุลินทรีย์และสารทำปฏิกิริยาอัตโนมัติ ตัวอย่างของการตกตะกอน
การตกตะกอน
ตอนนี้ มาดูวิธีการตั้งค่าปฏิกิริยาการตกตะกอน
ปฏิกิริยาการตกตะกอนแบบวงแหวนซึ่งเกิดขึ้นในหลอดทดลองที่เตรียมขึ้นเป็นพิเศษ เซรั่มถูกนำเข้าไปในโพรงของจาน เทเซรั่มลงบนผนังโดยใช้ปิเปตพวยกา ถัดไป ปริมาณตะกอนที่เหมาะสมจะถูกจัดวางบนชั้นอย่างระมัดระวัง จากนั้นท่อจะถูกนำไปยังตำแหน่งแนวตั้งจากแนวนอนการตั้งค่าและคำนึงถึงปฏิกิริยาการตกตะกอนเป็นการดำเนินการที่พิถีพิถันมาก ผลลัพธ์จะถูกบันทึกหลังจากการปรากฏตัวของวงแหวนสีขาวบนเส้นขอบระหว่างแอนติเจนและแอนติบอดี หากองค์ประกอบที่ทำปฏิกิริยาของปฏิกิริยาสอดคล้องกัน พวกมันจะเกาะกัน แต่สิ่งนี้จะสังเกตเห็นได้ชัดเจนหลังจากปฏิสัมพันธ์กันเป็นเวลานาน
ปฏิกิริยาการตกตะกอนจะดำเนินการในจานเพาะเชื้อหรือบนแก้ว สไลด์ ที่เจลวุ้นถูกถ่ายเทลงในชั้นเล็ก ๆ หลังจากที่เจลแข็งตัวแล้ว หลุมจำนวนเล็กน้อยจะถูกตัดออกเพื่อใส่แอนติเจนและแอนติบอดี้ มีสองวิธีในการดำเนินการนี้: วิธีการของภูมิคุ้มกันในแนวรัศมีและภูมิคุ้มกันแบบคู่
ข้อมูลทั่วไป
กลไกการตกตะกอนคล้ายกับกลไกการเกาะติดกัน ภายใต้อิทธิพลของซีรั่มประเภทภูมิคุ้มกัน แอนติเจนซึ่งได้เข้าสู่ปฏิกิริยาแล้ว จะลดระดับการกระจายตัวของมัน เงื่อนไขที่สำคัญคือความโปร่งใสของทั้งซีรัมและแอนติเจน
คุณสามารถปรับปรุงการลงทะเบียนของปฏิกิริยาได้หากคุณวางแอนติเจนบนแอนติบอดี ส่งผลให้สามารถสังเกตการปรากฏตัวของตะกอนในรูปของวงแหวนได้ ปรากฏการณ์นี้เรียกว่าการตกตะกอนของวงแหวนและดำเนินการในท่อพิเศษที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 2.5 ถึง 3.5 มม. ตัวอย่างที่พบบ่อยที่สุดของปฏิกิริยาการตกตะกอนคือการวินิจฉัยโรคแอนแทรกซ์
การตกตะกอนทำให้สามารถระบุระดับความเป็นพิษของการเพาะเลี้ยงโรคคอตีบในวุ้นได้
ระหว่างปฏิกิริยาที่พิจารณาการตกตะกอนของแอนติเจนเชิงซ้อนและแอนติบอดีเกิดขึ้น ปริมาณน้ำฝนเป็นปรากฏการณ์ทางภูมิคุ้มกันที่ทำให้คุณสามารถระบุปริมาณของแอนติบอดีในซีรัมในเลือดของผู้ป่วยและสัตว์ที่ได้รับการฉีดวัคซีน
ผลที่ตามมาของการไทเทรต
สิ่งสำคัญคือต้องรู้ว่าข้อมูลที่ได้จากการไทเทรตของวิธีการข้างต้นนั้นไม่สามารถวัดปริมาณได้ ในการสร้างและวิเคราะห์การประเมินเชิงปริมาณของจำนวนแอนติบอดีที่มีอยู่ เทคนิคปฏิกิริยาพิเศษได้รับการพัฒนาโดย M. Heidelberger และ E. Kabat ซึ่งขึ้นอยู่กับการค้นหาและการระบุโซนสมมูล การผสมจำนวนอายุของแอนติเจนกับแอนติเจนในปริมาณคงที่จะทำให้เกิดการตกตะกอนที่เกิดขึ้นในขั้นต้นเพิ่มขึ้น และจากนั้นก็ลดลงอีกครั้งเนื่องจากความสามารถในการละลายสารเชิงซ้อนของแอนติเจนที่เพิ่มขึ้น เมื่อกำหนดปริมาณของแอนติบอดีในส่วนลอยเหนือตะกอนที่บรรจุอยู่ในหลอดแต่ละหลอด คุณจะพบว่าของเหลวจำนวนหนึ่งที่มีแอนติบอดีจะขาดอาหาร เมื่อเปรียบเทียบกับหลอดทดลองอื่นๆ จะเกิดการตกตะกอนที่ใหญ่ที่สุด ด้วยเหตุนี้และการลบการตกตะกอนของโปรตีนแอนติเจนออกจากมูลค่ารวมของโปรตีน จึงเป็นไปได้ที่จะได้ค่าที่แน่นอนของแอนติบอดีที่มีอยู่ในปริมาตรของซีรัมเฉพาะที่กำลังศึกษา นอกจากนี้ ปริมาณของโมเลกุลโปรตีนของตะกอนจะถูกกำหนดโดยปริมาณไนโตรเจนหรือใช้วิธีการวัดสี
การประเมินค่า
การประมาณค่าการตกตะกอนในวิธีการวินิจฉัยควรคำนึงถึงความเป็นไปได้ของการมีอยู่ของซีรั่มภูมิคุ้มกันของแอนติบอดีที่ไม่มีคุณสมบัติของการตกตะกอนซึ่งตามมาด้วยการตกตะกอนเองอาจไม่เป็น เกิดขึ้นหลังจากทำปฏิกิริยากับแอนติเจน รายชื่อโมเลกุลดังกล่าวรวมถึงแอนติบอดีที่ไม่สมบูรณ์และบางชนิดจากกลุ่มแกมมา-เอโกลบูลิน
ปฏิกิริยาการตกตะกอนในห้องปฏิบัติการพบว่ามีการประยุกต์ใช้ในการดัดแปลงประเภทต่างๆ ตัวอย่างเช่น ปฏิกิริยาการตกตะกอนด้วยอุณหภูมิจะใช้ในการตรวจหาแอนติเจนของแบคทีเรียที่เป็นโรคโบทูลิซึม แอนแทรกซ์ ฯลฯ ซึ่งไม่ผ่านการทำให้เสียสภาพจากความร้อน ปฏิกิริยาประเภทนี้แตกต่างจากการตกตะกอนของวงแหวน ปฏิกิริยาประเภทนี้ใช้การกรองของวัสดุที่เป็นปัญหาในสถานะต้ม
การวิเคราะห์ปฏิกิริยาการตกตะกอนในส่วนผสมที่ซับซ้อนไม่อนุญาตให้บุคคลหนึ่งระบุคุณสมบัติขององค์ประกอบแต่ละส่วนของของผสม ในกรณีเช่นนี้ บุคคลจะใช้วิธีการตกตะกอนในวุ้นและใช้อิมมูโนอิเล็กโทรฟีเรซิสด้วย
ฝนกระจาย
ในพื้นที่ของการวิจัยนี้มีแนวคิดของปฏิกิริยาการตกตะกอนแบบกระจาย (RPD) มันขึ้นอยู่กับความสามารถในการแพร่กระจายในเจลของแอนติบอดีและแอนติเจนที่ละลายน้ำได้ การแพร่กระจายคือความสามารถของโมเลกุลของสารบางชนิดในการแทรกซึมเข้าไปในโมเลกุลของอีกสารหนึ่ง ซึ่งเกิดจากการเคลื่อนตัวของความร้อน
Gel เป็นระบบแบบกระจายซึ่งเฟสของของเหลวจะกระจายอย่างเท่าเทียมกันในเฟสของแข็ง ปฏิกิริยาดังกล่าวมักใช้เจลวุ้น
หลังจากระบุพารามิเตอร์แล้ว inสภาวะที่โมเลกุลสามารถแพร่กระจายไปตามแต่ละอื่น ๆ การประชุมของพวกมันจะมาพร้อมกับการก่อตัวของแอนติเจน + แอนติบอดีที่ซับซ้อน เนื้องอกดังกล่าวสามารถแพร่กระจายโดยอยู่ในตัวเจลและจะตกตะกอนโดยอยู่ในรูปของแถบที่สามารถตรวจพบได้ด้วยตาเปล่า หากแอนติเจนและแอนติบอดีเป็นเนื้อเดียวกัน จะไม่เกิดแถบใดๆ
การสร้างเงื่อนไขที่จะเกิดการแพร่กระจายในขณะที่อยู่ในชั้นวุ้นนั้นเกี่ยวข้องกับการเทส่วนประกอบ แต่จำนวนหลุมทั้งหมดและตำแหน่งสัมพัทธ์จะถูกกำหนดโดย ประเภทของงานที่ต้องตัดสินใจ RPD ช่วยให้บุคคลสามารถตรวจจับและระบุไวรัสที่แยกได้ซึ่งไม่รู้จักโดยการทดสอบโดยใช้แอนติบอดีที่รู้จัก
แอปพลิเคชัน
หยาดน้ำฟ้ามีการใช้กันอย่างแพร่หลายไม่เพียงแต่ในการวินิจฉัยโรคเท่านั้น แต่ยังพบการประยุกต์ใช้ในการตรวจทางนิติเวชอีกด้วย เป็นการยากที่จะจินตนาการถึงการวิเคราะห์ซึ่งเป็นไปได้ที่จะระบุชนิดของเลือด ส่วนหนึ่งของอวัยวะหรือเนื้อเยื่อที่พบในอาวุธอาชญากรรมที่ไม่ใช้ปฏิกิริยาการตกตะกอน ในระหว่างกระบวนการนี้จะใช้ซีรั่มตกตะกอนซึ่งได้มาจากการสร้างภูมิคุ้มกันให้กับสัตว์และนกต่างๆ เป็นสิ่งสำคัญที่ระดับ titer ในซีรัมต้องไม่ต่ำกว่า 1:10000, และต้องมีความจำเพาะเพียงพอด้วย จากจุดที่ตรวจพบเลือดหรือเปลือกของมัน สารสกัดถูกสร้างขึ้นสำหรับร่างกาย สารละลายซึ่งจะถูกเปิดเผยต่อไปถึงเซรั่มตกตะกอน จากปฏิกิริยานี้ เป็นไปได้ที่จะกำหนดชนิดของโปรตีนในเนื้อเยื่อและอวัยวะของทั้งมนุษย์และสัตว์ การได้มาซึ่งสารสกัดขุ่นทำให้คนต้องหันไปตกตะกอนบนวุ้น
สรุป
การวิเคราะห์ข้อมูลที่อ่านทำให้เราสรุปได้ว่าปฏิกิริยาการตกตะกอนมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับบุคคล เนื่องจากช่วยให้วินิจฉัยแอนติเจนต่างๆ โดยใช้แอนติบอดี ปรากฏการณ์นี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจทางนิติเวชและช่วยให้คุณระบุประเภทของ เลือด เนื้อเยื่อ หรืออวัยวะโดยสัมพันธ์กับเรื่องเฉพาะ ปริมาณน้ำฝนมีหลายประเภทและหลายวิธี ซึ่งใช้ตามความต้องการของปัญหาที่กำลังได้รับการแก้ไข