Radioimmune assay ทางจุลชีววิทยา: การประยุกต์ใช้, กลไก

สารบัญ:

Radioimmune assay ทางจุลชีววิทยา: การประยุกต์ใช้, กลไก
Radioimmune assay ทางจุลชีววิทยา: การประยุกต์ใช้, กลไก
Anonim

ยาแผนปัจจุบันมีวิธีการวินิจฉัยเฉพาะที่ทำให้สามารถระบุสาเหตุของโรคในมนุษย์ได้โดยอาศัยคำจำกัดความของเชื้อโรค สารแปลกปลอมทางพันธุกรรมที่กระตุ้นการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน กรดนิวคลีอิก ตลอดจนการเปลี่ยนแปลงการแพ้และภูมิคุ้มกัน ที่เกิดจากการกระทำของเขา วันนี้ RIA ใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านภูมิคุ้มกันวิทยาและไวรัสวิทยานั่นคือ radioimmunoassay เป้าหมายของการตั้งค่าส่วนประกอบหลักสูตรการบัญชีซึ่งเราจะพิจารณาในบทความนี้ การทดสอบนี้สามารถตรวจจับแอนติเจนอันเป็นผลมาจากการมีปฏิสัมพันธ์กับแอนติบอดี

ภูมิคุ้มกัน
ภูมิคุ้มกัน

คำจำกัดความ

RIA เป็นวิธีการวินิจฉัยสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในของเหลว ซึ่งขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาของแอนติเจนกับแอนติบอดีเมื่อใช้สารคล้ายคลึงที่ติดฉลากเรดิโอนิวไคลด์ซึ่งมีระบบจับพิเศษ หลังจากมีปฏิสัมพันธ์กันคอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันถูกสร้างขึ้นซึ่งแยกออกจากกันและมีการศึกษากัมมันตภาพรังสี เป็นที่ทราบกันว่าเรดิโออิมมูโนแอสเสย์ดำเนินการโดยใช้ชุดรีเอเจนต์มาตรฐาน

รีเอเจนต์แต่ละตัวสามารถระบุความเข้มข้นของสารเฉพาะได้หนึ่งชนิด ของเหลวชีวภาพที่นำมาจากบุคคลผสมกับรีเอเจนต์หลังจากระยะฟักตัว สารกัมมันตภาพรังสีอิสระและที่ถูกผูกไว้จะถูกแยกออก จากนั้นจึงทำการวัดด้วยรังสีและคำนวณผลลัพธ์ ไอโซโทปของไอโอดีนใช้สำหรับติดฉลากสาร มันถูกทำเครื่องหมายและเพิ่มในจำนวนที่แน่นอน

จุลชีววิทยา
จุลชีววิทยา

แอปพลิเคชัน

การตรวจทางรังสีวิทยามีการประยุกต์ใช้อย่างกว้างขวางในด้านการแพทย์และจุลชีววิทยา ใช้ในการวินิจฉัยโรคหัวใจและหลอดเลือด โรคของต่อมไร้ท่อ และระบบอื่นๆ ของร่างกาย RIA มักใช้เพื่อระบุสาเหตุของภาวะมีบุตรยาก พยาธิสภาพของพัฒนาการของทารกในครรภ์ ในด้านเนื้องอกวิทยา การวิเคราะห์นี้ดำเนินการเพื่อกำหนดเครื่องหมายของเนื้องอกเพื่อให้สามารถติดตามประสิทธิภาพของการรักษาได้ ในด้านภูมิคุ้มกันวิทยา RIA ใช้เพื่อศึกษาการปรากฏตัวของอิมมูโนโกลบูลิน เอนไซม์ โปรตีน และอื่นๆ ในเลือด วันนี้ การวิเคราะห์นี้ทำให้คุณสามารถตรวจจับความเข้มข้นของฮอร์โมนต่างๆ ได้มากถึงหนึ่งในล้านของหนึ่งกรัม ดังนั้น การวิเคราะห์เลือดด้วยภูมิคุ้มกันทางรังสีจึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านโรคหัวใจ มะเร็งวิทยา ต่อมไร้ท่อ นรีเวชวิทยา และไวรัสวิทยา

แอปพลิเคชั่น
แอปพลิเคชั่น

วิธี RIA

เป็นธรรมเนียมที่จะต้องแยกแยะระหว่างวิธีการวิเคราะห์ต่างๆ ขึ้นอยู่กับธรรมชาติปฏิกิริยา:

  1. วิธีการที่ไม่แข่งขันกันมีลักษณะเฉพาะด้วยส่วนประกอบปฏิกิริยาเช่นแอนติเจนมาตรฐานและแอนติเจนที่ตรวจจับได้ สารละลายบัฟเฟอร์ แอนติบอดีที่ติดฉลากไอโซโทป แอนติบอดีบางชนิดที่จับกับตัวดูดซับ แอนติเจนจะถูกเพิ่มไปยังแอนติบอดีที่จะทดสอบ หลังจากการฟักไข่คอมเพล็กซ์แอนติเจน - แอนติบอดีจะปรากฏขึ้นตัวดูดซับจะถูกล้างเพิ่มแอนติบอดีที่ติดฉลากซึ่งจับกับแอนติเจนในคอมเพล็กซ์ กัมมันตภาพรังสีขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของแอนติเจนที่กำลังทดสอบ
  2. เรดิโออิมมูโนแอสเสย์แข่งขันถูกขับเคลื่อนโดยการแข่งขันแอนติเจน มีส่วนประกอบของปฏิกิริยาเช่นกลุ่มควบคุมและแอนติเจนที่กำหนดหา สารละลายบัฟเฟอร์ แอนติบอดีบางชนิดที่จับกับตัวดูดซับ รวมทั้งแอนติเจนที่ติดฉลากไอโซโทป การวินิจฉัยเริ่มต้นด้วยการแนะนำของแอนติเจนที่กำลังถูกตรวจสอบ คอมเพล็กซ์แอนติเจนและแอนติบอดีถูกสร้างขึ้นบนตัวดูดซับ จากนั้นตัวดูดซับจะถูกล้างและฉีดแอนติเจนที่ติดฉลาก การทำเช่นนี้จะจับกับแอนติบอดี ด้วยความช่วยเหลือของตัวนับ ปฏิกิริยาและปริมาณของกัมมันตภาพรังสีจะถูกวัด มันจะเป็นสัดส่วนผกผันกับปริมาณของแอนติเจนในตัวอย่าง
  3. วิธีทางอ้อมเป็นวิธีที่พบได้บ่อยที่สุด ในกรณีนี้ การทดสอบภูมิคุ้มกันด้วยรังสีของส่วนประกอบปฏิกิริยามีอย่างเช่น ซีรั่มควบคุมและทดสอบ แอนติเจนหรือแอนติบอดีที่ถูกจับบนตัวดูดซับ แอนติบอดีที่ติดฉลากด้วยไอโซโทป สารละลายบัฟเฟอร์ แอนติบอดีหรือแอนติเจนที่ได้รับการวินิจฉัยจะทำปฏิกิริยากับแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่จับกับตัวดูดซับ จากนั้นนำฟักออก ฉีดแอนติบอดีที่ติดฉลากซึ่งจับกับแอนติเจน-แอนติบอดีเชิงซ้อน

วิธีการวิเคราะห์

ดังนั้น การตรวจภูมิคุ้มกันด้วยคลื่นวิทยุจึงดำเนินการโดยใช้รีเอเจนต์พิเศษ ชุดนี้เป็นชุดมาตรฐาน ดังนั้นจึงไม่อนุญาตข้อผิดพลาดหรือการละเมิดใดๆ ผลการวินิจฉัยมีความน่าเชื่อถือ การวิเคราะห์ดำเนินการในตอนเช้าสำหรับสิ่งนี้พวกเขาเอาเลือดดำจากบุคคล ในห้องปฏิบัติการ ซีรั่มจะถูกแยกออกจากเลือดซึ่งจะใช้สำหรับ RIA ซีรั่มนี้ผสมกับรีเอเจนต์ ส่วนผสมที่ได้จะถูกฟักที่อุณหภูมิที่กำหนดในเทอร์โมสตัท

ไอโซโทปอิสระและที่ถูกผูกไว้จะถูกแยกจากกันในส่วนผสมที่ได้ หลังจากนั้นจะมีการตรวจสอบวัสดุที่ได้รับและคำนวณผลลัพธ์ กลไกการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยรังสีมีหลายทางเลือก เทคนิคที่อธิบายข้างต้นเป็น RIA ที่เป็นของเหลว เนื่องจากส่วนประกอบทั้งหมดอยู่ในสถานะของเหลว มี RIA และโซลิดเฟส ซึ่งแอนติบอดีจะอยู่ในพาหะที่ไม่ละลายในของเหลว

การตรวจเลือดด้วยภูมิคุ้มกัน
การตรวจเลือดด้วยภูมิคุ้มกัน

ความพร้อมใช้งานของการวินิจฉัย

วิธีการวินิจฉัยนี้ในทางการแพทย์กำลังเป็นที่นิยมมากขึ้นทุกปี เมื่อเร็ว ๆ นี้ radioimmunoassay ได้กลายเป็นวิธีการวินิจฉัยมาตรฐานที่แพทย์สามารถกำหนดได้เมื่อทำการวินิจฉัยขั้นสุดท้าย เป็นเวลานานที่การวิเคราะห์ประเภทนี้ดำเนินการในห้องปฏิบัติการเท่านั้น วันนี้ได้กลายเป็นวิธีการวิจัยทั่วไป แต่ RIA ต้องใช้อุปกรณ์ราคาแพง (ตัวนับแกมมา) และชุดรีเอเจนต์มีอายุการใช้งานสั้น ทั้งหมดนี้เป็นข้อเสียเปรียบหลักของการวิเคราะห์ดังกล่าว ซึ่งกำหนดของมันราคาแพง

นอกจากนี้ RIA ได้เริ่มแทนที่วิธีการวิจัยที่ทันสมัยมากขึ้นเมื่อเร็ว ๆ นี้ซึ่งไม่ต้องการปฏิสัมพันธ์กับไอโซโทป ซึ่งรวมถึงเอ็นไซม์อิมมูโนแอสเซย์ ดังนั้น RIA จึงเป็นที่ต้องการในคลินิกหลายแห่ง มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในเมืองใหญ่และศูนย์วินิจฉัยโรค แต่ในโรงพยาบาลทั่วไปในเมืองเล็กๆ การวิเคราะห์นี้แทบจะไม่ได้ใช้เลย เนื่องจากมีค่าใช้จ่ายสูง

ส่วนประกอบการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยรังสี
ส่วนประกอบการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยรังสี

ศักดิ์ศรีของ RIA

Radioimmunoassay มีข้อดีหลายประการ มีความเฉพาะเจาะจงและมีความไวสูง ซึ่งทำให้สามารถตรวจสอบการมีอยู่ของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในปริมาณที่น้อยมากอย่างไม่น่าเชื่อ การวิเคราะห์นี้ดำเนินการอย่างง่าย ๆ บุคคลจะต้องบริจาคเลือดดำเท่านั้น ผลการทดสอบแม่นยำ 100% และพร้อมในวันถัดไป RIA ยังสามารถทำงานอัตโนมัติได้อย่างง่ายดาย ดังนั้น การวิเคราะห์นี้ทำให้คุณสามารถระบุโปรตีนที่เป็นของเสียจากแบคทีเรียที่ติดเชื้อ ซึ่งบ่งชี้ว่ามีการติดเชื้อในร่างกาย

การวิเคราะห์ภูมิคุ้มกันทางวิทยุของเป้าหมายในการจัดทำบัญชีความคืบหน้าของส่วนประกอบ
การวิเคราะห์ภูมิคุ้มกันทางวิทยุของเป้าหมายในการจัดทำบัญชีความคืบหน้าของส่วนประกอบ

การวินิจฉัยไวรัสวิทยา

RIA ที่มีแนวโน้มมากที่สุดสำหรับไวรัสวิทยา เพราะช่วยให้คุณสามารถระบุเชื้อโรคไวรัสได้อย่างรวดเร็ว เนื่องจากในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา อุบัติการณ์ของการติดเชื้อต่างๆ ได้เพิ่มขึ้น ซึ่งกำลังแพร่กระจายด้วยความเร็วสูง ทำให้ผู้คนเสียชีวิต โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับประเทศที่ไม่สูงการพัฒนาทางสังคมและเศรษฐกิจ (ประเทศในฟาร์อีสท์) radioimmunoassay เป็นสิ่งที่ขาดไม่ได้ที่นี่ จุลชีววิทยายังใช้วิธีการวินิจฉัยนี้เพื่อตรวจหาโรคติดเชื้อที่เกิดจากแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรค ตัวอย่างเช่น RIA ใช้กันอย่างแพร่หลายในการตรวจหาไข้ไทฟอยด์ ในวันแรกของโรคก่อนการรักษาจำเป็นต้องทำการศึกษาอุจจาระและอาเจียน อย่างไรก็ตามผลการวินิจฉัยจะได้รับหลังจากเวลาผ่านไปนาน RIA เข้ามาช่วยเหลือการวิเคราะห์ช่วยให้คุณสามารถระบุสาเหตุของโรคได้ในเวลาอันสั้น ผู้บริจาคโลหิตในวันรุ่งขึ้นผลการศึกษาก็พร้อม การวิเคราะห์นี้ช่วยในการวินิจฉัยที่ถูกต้อง

ผลลัพธ์

Radioimmunoassay เป็นหนึ่งในวิธีการวินิจฉัยที่ละเอียดอ่อนที่สุดในปัจจุบัน มันถูกใช้ในการวิเคราะห์สารใด ๆ ที่สามารถหาแอนติบอดี้ได้ วิธีนี้ทำให้สามารถสร้างตัวอย่างจำนวนมากในปริมาตรที่เล็กที่สุดของของเหลวที่ตรวจสอบได้ เช่นเดียวกับการบันทึกผลลัพธ์ในเวลาที่สั้นที่สุด เนื่องจากสามารถดำเนินการอัตโนมัติทั้งหมดได้ การวิเคราะห์นี้พัฒนาขึ้นในปี 1950 โดยโซโลมอน เบอร์สัน สามสิบปีต่อมาก็แพร่หลาย จนถึงปัจจุบัน ไม่มีทางเลือกอื่นแทน RIA ร้อยเปอร์เซ็นต์ เนื่องจากการวิเคราะห์มีความไวสูง RIA ใช้ในสาขาการแพทย์ต่างๆ เช่นเดียวกับในจุลชีววิทยาและไวรัสวิทยา

กลไกการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยรังสี
กลไกการตรวจภูมิคุ้มกันด้วยรังสี

สุดท้าย

การใช้วิธีการในไวรัสวิทยามีความเกี่ยวข้องมากในปัจจุบัน อย่างที่บอกความสามารถในการตรวจสอบการแพร่กระจายของการติดเชื้อ ทำการวินิจฉัยที่ถูกต้อง และกำหนดการรักษาเฉพาะ ปัญหานี้มีความเกี่ยวข้องโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับประเทศที่มีระดับเศรษฐกิจและการพัฒนาสังคมต่ำ นอกจากนี้ การวิเคราะห์นี้ยังช่วยให้คุณตรวจจับปริมาณฮอร์โมนและเอ็นไซม์ในร่างกายมนุษย์ได้อีกด้วย เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ ผู้วิจัยจำเป็นต้องบริจาคเลือดเพื่อการวิเคราะห์เท่านั้น ยาไม่หยุดนิ่ง ควบคู่ไปกับการตรวจด้วยภูมิคุ้มกัน วิธีการวิจัยใหม่ปรากฏขึ้น แต่ RIA ยังคงเป็นหนึ่งในผู้นำด้านการวินิจฉัยทางการแพทย์

แนะนำ: